چکيده

در این مطالعه پروتئین لوسیفراز متعلق به گونه Lampyris turkestanicus و برخی جهش یافته‌های آن که در آن‌ها بارهای سطحی متحمل تغییر شده بودند، جهت انجام مطالعات سینتیکی واسرشتگی با استفاده از آزمایش‌های تغییر آنی pH توسط دستگاه جریان متوقف متصل به تکنیک فلوئورسانس مورد استفاده قرار گرفتند. همه طیف‌های سینتیکی حاصل از این مطالعات با استفاده از نرم‌افزار بیوکین مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفته و با یک منحنی نمایی از نوع درجه اول مطابقت داده شدند. بنابراین ثابت‌های سرعت مربوط به واکنش‌های واسرشتگی بدست آمدند. ثابت‌های سرعت واکنش‌های واسرشتگی را می‌توان با استفاده از فرمول نظریه حالت گذار به تغییرات انرژی حالت گذار واکنش (∆G‡) تبدیل نمود. بر اساس نتایج حاصل از این مطالعه، جایگزینی گلوتامیک اسید توسط آرژینین (جهش یافته ER) منجر به کاهش یافتن ثابت سرعت واکنش واسرشتگی و افزایش تغییرات انرژی حالت گذار واکنش واسرشتگی در اثر تغییر آنی pH می‌گردد.  این در حالی است که وارد کردن یک آرژینین دیگر در جهش یافته ER (جهش یافته ERR) و جایگزین نمودن گلوتامیک اسید توسط لیزین (جهش یافته EK) منجر به افزایش ثابت سرعت واکنش‌های واسرشتگی جهش یافته‌ها و کاهش سد انرژی واکنش واسرشتگی نسبت به پروتئین نوع وحشی لوسیفراز می‌گردد. نتیجه‌گیری ما این بود که سد انرژی واکنش واسرشتگی در اثر تغییر ناگهانی pH متاثر از توازن بارهای سطحی پروتئین می‌باشد.